021-39921927
產(chǎn)品簡介
大鼠外周血來源內(nèi)皮祖細胞的相關(guān)*：細胞胰腺脂活性比色法定量檢測試劑盒 20次組織胰腺脂活性比色法定量檢測試劑盒 20次細胞肝脂活性比色法定量檢測試劑盒 20次組織肝脂活性比色法定量檢測試劑盒 20次細胞脂蛋白脂活性比色法定量檢測試劑盒 20次組織脂蛋白脂活性比色法定量檢測試劑盒 20次
產(chǎn)品分類
| 品牌 | 其他品牌 | 貨號 | GOY-01X1105 |
|---|---|---|---|
| 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 大鼠外周血來源內(nèi)皮祖細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1105 |
商品介紹：
名稱 大鼠外周血來源內(nèi)皮祖細胞 2.組織來源：外周血 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介： 大鼠外周血來源內(nèi)皮祖細胞分離自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細胞，我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞，在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。內(nèi)皮祖細胞是血管內(nèi)皮細胞的前體細胞，亦稱為成血管細胞（Angioblast），是一群具有游走特性，能進一步增殖分化的幼稚內(nèi)皮細胞，缺乏成熟內(nèi)皮細胞的特征性表型，不能形成管腔樣結(jié)構(gòu)，其功能主要為參與了出生后缺血組織的血管發(fā)生和血管損傷后的修復(fù)。研究顯示，內(nèi)皮祖細胞在心腦血管疾病、外周血管疾病、腫瘤血管形成及創(chuàng)傷愈合等方面均發(fā)揮重要作用，并為缺血性疾病的研究治療提供了新思路，EPCs生物學(xué)特性和治療作用的研究成為這一領(lǐng)域新的熱點。 5.方法簡介： 實驗室分離的大鼠外周血來源內(nèi)皮祖細胞采用采集外周血、密度梯度離心、差速貼壁法結(jié)合內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測： 實驗室分離的大鼠外周血來源內(nèi)皮祖細胞經(jīng)CD34免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%） 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-R134 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)內(nèi)皮細胞樣 傳代特性可傳1-2代；不建議多次傳代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Dectin-1 / CLEC7A 轉(zhuǎn)錄變體2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
Dectin-1 / CLEC7A 轉(zhuǎn)錄變體2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
FGF7 / KGF 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
FGF7 / KGF 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
CD209 / DC-SIGN 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
CD209 / DC-SIGN 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
CNTN3 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
Dkk1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
Dkk1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
C2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
大鼠外周血來源內(nèi)皮祖細胞0.78-50 umol/L E（Vitamin E）ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Histone acetyltransferase KAT8
0.156-10 ng/mL 人蔗糖轉(zhuǎn)運因子SWEET1(SWEET1)ELISA試劑盒
15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Obestatin
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Iduronate 2-sulfatase
0.156-10 ng/mL 人酐Ⅸ(Carbonic anhydrase 9)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Ras GTPase-activating-like protein IQGAP1
0.312-20 ng/mL 人細胞凋亡調(diào)整器BAX（Apoptosis regulator BAX）ELISA試劑盒
沙門、志賀菌屬瓊脂培養(yǎng)基（SS） 英文名稱：Salmonella-Shigella 產(chǎn)品規(guī)格：250g
鹽緩沖液（pH7.2） 英文名稱：PBS broth 產(chǎn)品規(guī)格：250g
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