細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺(tái)，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動(dòng)使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

RGC-5細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試，本產(chǎn)品可保持RGC-5細(xì)胞最佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含RGC-5 細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無(wú)需添加任何成分，可直接用于RGC-5 細(xì)胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

F12 基礎(chǔ)培養(yǎng)基                              445 ml

特級(jí)胎牛血清                             50 ml

運(yùn)輸和保存

運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；?

注意事項(xiàng)：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來(lái)水沖洗即可。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動(dòng)使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)到80%~90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動(dòng)使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時(shí)后或過(guò)夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠(HYD)ELISA pcr檢測(cè)試劑盒

Human urinary free coisol (UFC) ELISA Kit 人尿游離(UFC)試劑盒

HumanMyosinlightChain,MLCELISAKit 人肌球蛋白輕鏈(MLC)pcr檢測(cè)試劑盒分裝

GuineapigovalbuminspecificIgG,OVAsIgG試劑盒豚鼠卵清蛋白特異性IgG(OVAsIgG)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧(ROS)初級(jí)綠色熒光測(cè)定試劑盒50次

Mousebonemorphogeneticproteins,BMPsELISAKit小鼠骨形成蛋白(BMPs)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)試劑盒 ，英文名： CRF ELISA Kit

Mouse 15 lipoxygenase (15-LO/LOX) ELISA Kit 小鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)試劑盒

ELISA 小鼠骨成型蛋白受體1A(mouse BMP-R1A) 分裝

CLIAKitforLIFR(Mouseleukemiainhibitoryfactorreceptor)ELISAKit小鼠白血病抑制因子受體

通用型ECL化學(xué)發(fā)光顯影試劑盒10次

ELISAKit17-OHCS雞17羥皮質(zhì)類固醇

糖化血紅蛋白（）測(cè)試盒   Glycosylated hemoglobin () test kit

肝/肌糖元測(cè)試盒   Liver / muscle glycogen test kit

β-葡萄糖酸苷酶測(cè)試盒   Beta - glucose - acid - enzyme test case

紅細(xì)胞NADH高鐵血紅蛋白還原酶測(cè)試盒   Erythrocyte NADH high iron hemoglobin reductase test kit

FAM55C蛋白抗體

二?；视王；D(zhuǎn)移酶2樣蛋白6抗體

Spike中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike protein fragment (RBD, aa 367-606, His 標(biāo)簽) Protein

Tau protein 微管相關(guān)蛋白(抗原 0.5mgTau protein 微管相關(guān)蛋白(抗原)

CTLA4重組人 CTLA4 / CD152 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

IFNL1 Protein Human 重組人 IL29 / IFNL1 蛋白

TREM1 Protein Human 重組1*125ML/500ML

RGC-5 細(xì)胞專用培養(yǎng)基Tau protein 微管相關(guān)蛋白(抗原 0.5mgTau protein 微管相關(guān)蛋白(抗原)

IFNL1 Protein Human 重組人 IL29 / IFNL1 蛋白

Spike中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike protein fragment (RBD, aa 367-606, His 標(biāo)簽) Protein

TREM1 Protein Human 重組人 TREM1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

CTLA4重組人 CTLA4 / CD152 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein