細胞實驗步驟：

一、細胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞，將細胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻，并做好標記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細胞密度及狀態(tài)；

14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

MINO細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持MINO細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含MINO細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于MINO 細胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

RPMI 1640 基礎(chǔ)培養(yǎng)基                            420 mL

特級胎牛血清                                            75 mL

運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；?

注意事項：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細胞培養(yǎng)步驟：

?細胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細胞傳代?：

當細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當細胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補加新鮮培養(yǎng)基。

做好標記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠酶(CA)ELISA pcr檢測試劑盒

Human follistatin (FS) ELISA Kit 人卵泡抑素(FS)試劑盒

Humanglycosylation-dependecelladhesionmolecule-1,GlyCAM-1ELISAKit 人糖基化依賴的細胞黏附分子(GlyCAM-1)pcr檢測試劑盒分裝

DeerEndothelialniicoxidesyhase,eNOS試劑盒內(nèi)皮型合成酶(eNOS)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細胞鈣交換體(NCX)蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MouseEndothelin1,ET-1ELISAKit小鼠內(nèi)皮素1(ET-1)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠生長分化因子5(GDF5)試劑盒 ，英文名： GDF5 ELISA Kit

Mouse vitamin K1 (VK1) ELISA Kit 小鼠K1(VK1)試劑盒

Ratai-spermaibody,AsAbELISAKit 大鼠抗抗體(AsAb)pcr檢測試劑盒分裝

CLIAKitforHcyELISAKit大鼠同型半胱

細胞VZV(VARICELLAZOSTER)病毒定量PCR擴增試劑盒20次

人高香草酸(HVA)ELISAKit人腺嘌呤二核苷酸0酸(NADPH)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠酸性粒細胞趨化因子試劑盒   小鼠酸性粒細胞趨化因子試劑盒      小鼠酸性粒細胞趨化因子試劑盒，，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠酸性粒細胞趨化因子試劑盒、小鼠酸性粒細胞趨化因子eisa試劑盒

小鼠小扁結(jié)合型甲胎蛋白試劑盒   小鼠小扁結(jié)合型甲胎蛋白試劑盒      小鼠小扁結(jié)合型甲胎蛋白試劑盒，，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠小扁結(jié)合型甲胎蛋白試劑盒、小鼠小扁結(jié)合型甲胎蛋白eisa試劑盒

小鼠表皮調(diào)節(jié)素試劑盒   小鼠表皮調(diào)節(jié)素試劑盒      小鼠表皮調(diào)節(jié)素試劑盒，，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠表皮調(diào)節(jié)素試劑盒、小鼠表皮調(diào)節(jié)素eisa試劑盒

豚鼠神經(jīng)肽A試劑盒   豚鼠神經(jīng)肽A試劑盒      豚鼠神經(jīng)肽A試劑盒，，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠神經(jīng)肽A試劑盒、豚鼠神經(jīng)肽Aeisa試劑盒

腫瘤血管內(nèi)皮標志物8抗體

α輔助因子44抗體

HA重組甲型流感 H14N5 (A/Mallard/Astrakhan(Gurjev)/263/1982) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

PARP(poly ADP-ribose polymerase 0.5mgPARP(poly ADP-ribose polymerase) 多腺苷二0酸多聚酶抗原

LYN重組人 Lyn Kinase 蛋白 (GST 標簽) Protein

CHST11 Protein Human 重組人 CHST11 / C4ST-1 蛋白

BCA

MINO 細胞專用培養(yǎng)基PARP(poly ADP-ribose polymerase 0.5mgPARP(poly ADP-ribose polymerase) 多腺苷二0酸多聚酶抗原

CHST11 Protein Human 重組人 CHST11 / C4ST-1 蛋白

HA重組甲型流感 H14N5 (A/Mallard/Astrakhan(Gurjev)/263/1982) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

BCAM Protein Human 重組人 BCAM 蛋白 (Fc 標簽)

LYN重組人 Lyn Kinase 蛋白 (GST 標簽) Protein