細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺(tái)，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動(dòng)使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

AsPC-1細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試，本產(chǎn)品可保持AsPC-1細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含 AsPC-1 細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無(wú)需添加任何成分，可直接用于AsPC-1 細(xì)胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

RPMI-1640 基礎(chǔ)培養(yǎng)基                              445 ml

特級(jí)胎牛血清                                         50 mL

運(yùn)輸和保存

運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；?

注意事項(xiàng)：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來(lái)水沖洗即可。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動(dòng)使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)到80%~90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動(dòng)使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時(shí)后或過(guò)夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子B(VEGF-B)ELISA pcr檢測(cè)試劑盒

Rat calmodulin (CAM) ELISA Kit 大鼠鈣調(diào)素(CAM)試劑盒

Humanverylateappearingaigen,VLAELISAKit 人遲現(xiàn)抗原(VLA)pcr檢測(cè)試劑盒分裝

C3試劑盒鮭魚(yú)補(bǔ)體蛋白3規(guī)格：96T/48T

魚(yú)類受精卵細(xì)胞凍存試劑盒(低溫)50次

MouseInsulin,INSELISAKit小鼠胰島素(INS)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠降解產(chǎn)物(FDP)試劑盒 ，英文名： FDP ELISA Kit

Pla zeatin riboside (ZR) ELISA Kit 植物玉米素核苷(ZR)試劑盒

Mousemacrophageinflammatoryprotein5,MIP-5ELISAKit 小鼠巨噬細(xì)胞性蛋白5(MIP-5)pcr檢測(cè)試劑盒分裝

CLIAKitforHumanadvancedglycationendproducts,AGEsELISAKit人晚期糖基化終末產(chǎn)物

細(xì)胞HPV6(HUMANPAPILLOMAVIRUS-6)病毒定量PCR擴(kuò)增試劑盒20次

ELISAKitC3a大鼠補(bǔ)體片斷3a

小鼠牙本質(zhì)涎0蛋白   英文名稱：   Mouse Dein Sialophosphoprotein   英文縮寫(xiě)：   DSP

小鼠DNA抗體   英文名稱：   Mouse Deoxyribonucleic Acid Aibody   英文縮寫(xiě)：   DNA.Ab

小鼠氧化酶   英文名稱：   Mouse Diamine Oxidase   英文縮寫(xiě)：   DAO

小鼠多巴胺受體D1   英文名稱：   Mouse Dopamine receptor D1   英文縮寫(xiě)：   DRD1

6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框72抗體

氣味結(jié)合蛋白2A抗體

HA重組甲型流感 H5N1 (A/chicken/VietNam/NCVD-016/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

PACAP-38 腺苷酸環(huán)化酶激活肽-38(抗原 0.5mgPACAP-38 腺苷酸環(huán)化酶激活肽-38(抗原)

MANF重組人 MANF / ARMET 蛋白 Protein

CD47 Protein Human 重組人 CD47 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

ACVR1 Protein Human 重組人 ALK-2 / ACVR1 蛋白 (His

AsPC-1  細(xì)胞專用培養(yǎng)基PACAP-38 腺苷酸環(huán)化酶激活肽-38(抗原 0.5mgPACAP-38 腺苷酸環(huán)化酶激活肽-38(抗原)

CD47 Protein Human 重組人 CD47 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

HA重組甲型流感 H5N1 (A/chicken/VietNam/NCVD-016/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

ACVR1 Protein Human 重組人 ALK-2 / ACVR1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

MANF重組人 MANF / ARMET 蛋白 Protein