細胞實驗步驟：

一、細胞復蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風30min；

2.預熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞，將細胞懸液轉移到培養(yǎng)瓶內，補加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻，并做好標記；

13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態(tài)；

14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產品介紹

12Z細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經過長期測試，本產品可保持12Z細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產品中已包含12Z細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于12Z細胞的培養(yǎng)。

產品主要成分

DMEM/F12 基礎培養(yǎng)基                            445 mL

特級胎牛血清                                             50 mL

運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；?

注意事項：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內部；這部分有害物質的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細胞培養(yǎng)步驟：

?細胞復蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細胞傳代?：

當細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當細胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補加新鮮培養(yǎng)基。

做好標記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉移到冷凍保存管中，標記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉至液氮罐保存。

公司正在出售的產品：

小鼠型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA pcr檢測試劑盒

Human calf iestinal alkaline phosphatase (CIAP) ELISA Kit 人牛小腸堿性0酸酶(CIAP)試劑盒

HumanHydroxyproline-RichGlycoprotein,HRGPELISAKit 人羥脯糖蛋白(HRGP)pcr檢測試劑盒分裝

Human26Sproteasome,26SPSM試劑盒人26S蛋白酶體(26SPSM)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母纖維素酶(cellulase)活性熒光定量試劑盒20次

Mouseapelin12,AP12ELISAKit小鼠apelin12(AP12)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠葡萄糖60酸脫氫酶(G6PD)試劑盒 ，英文名： G6PD ELISA Kit

Mouse serum amyloid A (SAA) ELISA Kit 小鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)試劑盒

Ratai-IgEreceptoraibodyELISAKit 大鼠抗IgE受體抗體pcr檢測試劑盒分裝

CLIAKitforGP-IIELISAKit大鼠糖原0酸化酶同工酶II

細胞低密度脂蛋白(LDL-Cholesterol)酶連續(xù)循環(huán)比色法定量試劑盒20次

Rattissueinhibitorsofmetalloproteinase3,TIMP-3ELISAKit大鼠基質金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠可溶性CD30配體(sCD30L)ELISAKit   ELISA

小鼠干細胞因子/肥大細胞生長因子(SCF/MGF)ELISAKit   ELISA

小鼠基質細胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISAKit   ELISA

小鼠轉化生長因子β1(TGF-β1)ELISAKit   ELISA

DNA甲基轉移酶相關蛋白1抗體

干細胞生長因子SCGF抗體

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Mast Cell Chymase 肥大細胞類1 0.5mgMast Cell Chymase 肥大細胞類1

CALML5重組人 CALML5 / CLSP 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

CSNK2A2 Protein Human 重組人 CSNK2A2 / CK2A2 蛋白

ENPEP Protein Mouse 重組小鼠 ENPEP / Aminopeptidase A 蛋白

12Z 細胞專用培養(yǎng)基Mast Cell Chymase 肥大細胞類1 0.5mgMast Cell Chymase 肥大細胞類1

CSNK2A2 Protein Human 重組人 CSNK2A2 / CK2A2 蛋白

FGFR1重組食蟹猴 FGFR1 / CD331 蛋白 (Fc 標簽) Protein

ENPEP Protein Mouse 重組小鼠 ENPEP / Aminopeptidase A 蛋白

CALML5重組人 CALML5 / CLSP 蛋白 (His & GST 標簽) Protein