細胞實驗步驟：

一、細胞復蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風30min；

2.預熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞，將細胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻，并做好標記；

13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態(tài)；

14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

GT1-1細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持GT1-1細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含GT1-1細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于GT1-1細胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

DMEM/F12基礎培養(yǎng)基                             445mL

馬血清（國產(chǎn)）                                         25mL

特級胎牛血清                                     ???????

運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；?

注意事項：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細胞培養(yǎng)步驟：

?細胞復蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細胞傳代?：

當細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當細胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補加新鮮培養(yǎng)基。

做好標記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠髓過氧化物酶(MPO)ELISA pcr檢測試劑盒

Rat myoglobin (MYO/MB) ELISA Kit 大鼠肌紅蛋白(MYO/MB)試劑盒

Humanglycophosphatidylinositol,GPIELISAKit 人糖0脂酰肌醇(GPI)pcr檢測試劑盒分裝

differeiation40ligand,sCD40L試劑盒兔子可溶性CD40配體(sCD40L)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細胞線粒體復合物I蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MouseEmbryonicStemMESPU30,M30ELISAKit小鼠胚胎干細胞系MESPU30(M30)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠瘦素受體(LEPR)試劑盒 ，英文名： LEPR ELISA Kit

Mouse vitamin C (VC) ELISA Kit 小鼠C(VC)試劑盒

RatFMS-liketyrosinekinase3ligand,Flt-3LELISAKit 大鼠FMS樣酪激酶3配體(Flt3L)pcr檢測試劑盒分裝

CLIAKitforHEV-IgM(HumanHepatitisDvirusIgM)ELISAKit人戊型肝病毒IgM

細胞SYK激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKit1,3-βDglu大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶

小鼠水通道蛋白3(AQP-3)試劑盒

小鼠水通道蛋白2(AQP-2)試劑盒

小鼠水通道蛋白1(AQP-1)試劑盒

小鼠水通道蛋白0(AQP-0)試劑盒

粘膜相關淋巴組織淋巴瘤轉(zhuǎn)運蛋白1抗體

SHISA7蛋白抗體

CXCL9重組食蟹猴 CXCL9 / MIG / C-X-C motif chemokine 9 蛋白 Protein

M2-PK ( pyruvate Kinase M2 0.5mgM2-PK ( pyruvate Kinase M2) 酸激酶-M2(抗原)

FCGR2A重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 Arg, His & AVI 標簽) Protein

CKB Protein Human 重組人 CKB / Creatine kinase B type 蛋白

FCGRT & B2???????

GT1-1 細胞專用培養(yǎng)基M2-PK ( pyruvate Kinase M2 0.5mgM2-PK ( pyruvate Kinase M2) 酸激酶-M2(抗原)

CKB Protein Human 重組人 CKB / Creatine kinase B type 蛋白

CXCL9重組食蟹猴 CXCL9 / MIG / C-X-C motif chemokine 9 蛋白 Protein

FCGRT & B2M Protein Mouse 重組小鼠 FCGRT & B2M Heterodimer 蛋白

FCGR2A重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 Arg, His & AVI 標簽) Protein