細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動(dòng)使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

Jeko-1細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持Jeko-1細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含 Jeko-1 細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于Jeko-1細(xì)胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

RPMI-1640 基礎(chǔ)培養(yǎng)基                           445 mL

特級胎牛血清                                           50 mL

運(yùn)輸和保存

運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；?

注意事項(xiàng)：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動(dòng)使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長到80%~90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動(dòng)使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時(shí)后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

豬傳染性胃腸病毒抗體(TGEV)試劑盒

Human macrophage migration inhibitory factor (MIF) ELISA Kit 人巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)試劑盒

swinemajorhistocompatibilitycomplexⅠ,MHCⅠ/SLAⅠELISAKit 豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/SLAⅠ)試劑盒分裝

CLIAKitforALP(Mousealkalinephosphatase)ELISAKit小鼠堿性0酸酶

血液含量比色法定量試劑盒20次

Mouseα2-Aiplasmin,α2-APELISAKit小鼠α2抗纖溶酶(α2-AP)試劑盒

大鼠肝受體同源物1(LRH1)試劑盒 ，英文名： LRH1 ELISA Kit

Rat alpha 1 microglobulin (alpha 1-MG) ELISA Kit 大鼠α1微球蛋白(α1-MG)試劑盒

RatAngiopoietin1,ANG-1ELISAKit 大鼠血管生成素1(ANG-1)試劑盒分裝

CLIAKitforE2(MouseEsadiol)ELISAKit小鼠雌二醇

細(xì)胞培養(yǎng)污染性支原體M.arginini鑒定16SrDNAPCR擴(kuò)增試劑盒20次

RatInhibinbindingprotein,INHBPELISAKit大鼠抑制素結(jié)合蛋白(INHBP)試劑盒

粒細(xì)胞彈性蛋白酶   英文名稱：   Neuophil elastase   英文縮寫：   NE

神經(jīng)絲蛋白   英文名稱：   neurofilame protein   英文縮寫：   NF

神經(jīng)絲蛋白   英文名稱：   neurofilame protein   英文縮寫：   NF

核轉(zhuǎn)錄因子NF-KB   英文名稱：   Nuclear anscription Factor NF-KB   英文縮寫：   NF-KB

FBXW5蛋白抗體

APC標(biāo)記小鼠CD45R單克隆抗體

CTLA4重組食蟹猴 CTLA4 / CD152 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

LFABP/FABP-1(Liver Fatty acid binding protein 0.5mgLFABP/FABP-1(Liver Fatty acid binding protein) 肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白抗原

SEMA4A重組人 Semaphorin 4A / SEMA4A / Semaphorin B 蛋白  Protein

ALDH4A1 Protein Human 重組人 ALDH4A1 蛋白

MF???????

Jeko-1 細(xì)胞專用培養(yǎng)基LFABP/FABP-1(Liver Fatty acid binding protein 0.5mgLFABP/FABP-1(Liver Fatty acid binding protein) 肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白抗原

ALDH4A1 Protein Human 重組人 ALDH4A1 蛋白

CTLA4重組食蟹猴 CTLA4 / CD152 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

MFI2 Protein Mouse 重組小鼠 MFI2 / CD228 / melanotransferrin 蛋白

SEMA4A重組人 Semaphorin 4A / SEMA4A / Semaphorin B 蛋白  Protein