細(xì)胞實驗步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

AML12細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持AML12細(xì)胞最佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含 AML12 細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于AML12 細(xì)胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

DMEM/F12 基礎(chǔ)培養(yǎng)基                440 ml

特級胎牛血清                            50 ml

運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；?

注意事項：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長到80%~90%時，進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠酪蛋白酶pcr檢測試劑盒

Human prostate specific aigen (PSA) ELISA Kit 人前列腺特異性抗原(PSA)試劑盒

Humaetinolbindingprotein4,RBP-4ELISAKit 人結(jié)合蛋白4(RBP-4)pcr檢測試劑盒分裝

humanadrencocoicoopichormone,ACTH試劑盒人促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物DNA甲基轉(zhuǎn)移酶-1(MET-1)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量試劑盒20次

Mouseadiponectin,ADPELISAKit小鼠脂聯(lián)素(ADP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠能受體β3(ADRβ3)試劑盒 ，英文名： ADRβ3 ELISA Kit

Mouse peosidine ELISA Kit (Peosidine) 小鼠戊糖素(Peosidine)試劑盒

RatVitaminK1,VK1ELISAKit 大鼠K1(VK1)pcr檢測試劑盒分裝

CLIAKitforHBVpreS2Ag(HumanhepatitisBvirus)ELISAKit人乙型肝病毒前S2抗原

細(xì)胞α-L-巖藻糖苷酶(AFU)熒光定量試劑盒20次

swinemajorhistocompatibilitycomplexⅠ,MHCⅠ/SLAⅠELISAKit豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/SLAⅠ)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)試劑盒

小鼠基質(zhì)裂解素(ST2)試劑盒

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)試劑盒

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)試劑盒

Fas相互作用蛋白激酶2抗體

核苷酸還原酶M2B抗體

CD160重組食蟹猴 CD160 蛋白 Protein

Leptin receptor 瘦素受體(抗原 0.5mgLeptin receptor 瘦素受體(抗原)

GPA33重組人 GPA33 / Glycoprotein-A33 蛋白 Protein

DCLK1 Protein Human 重組人 DCAMKL1 / DCLK1 蛋白

MANF Protein Mouse 重組小鼠 MANF / ARMET 蛋白

AML12 細(xì)胞專用培養(yǎng)基Leptin receptor 瘦素受體(抗原 0.5mgLeptin receptor 瘦素受體(抗原)

DCLK1 Protein Human 重組人 DCAMKL1 / DCLK1 蛋白

CD160重組食蟹猴 CD160 蛋白 Protein

MANF Protein Mouse 重組小鼠 MANF / ARMET 蛋白

GPA33重組人 GPA33 / Glycoprotein-A33 蛋白 Protein