細(xì)胞實驗步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

PK-15細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持PK-15細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含 PK-15 細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于PK-15 細(xì)胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

MEM 基礎(chǔ)培養(yǎng)基                             445 ml

特級胎牛血清                               50 ml

運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；?

注意事項：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長到80%~90%時，進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠催產(chǎn)素(OT)ELISA pcr檢測試劑盒

Rat coagulation factor XII (F XII) ELISA Kit 大鼠Ⅻ(FⅫ)試劑盒

HumanComplemefragme5a,C5aELISAKit 人補體片斷5a(C5a)pcr檢測試劑盒分裝

Humanbasicfibroblastgrowthfactor6,bFGF-6試劑盒人堿性成纖維細(xì)胞生長因子6(bFGF-6)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物脂質(zhì)過氧化氫(H2O2)活性比色法定量試劑盒20次

Humaestoteronerecepter，ELISAKit人睪同受體()試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠吻素受體(KISS1R)試劑盒 ，英文名： KISS1R ELISA Kit

Mouse dihydrotestosterone (DHT) ELISA Kit 小鼠雙氫睪酮(DHT)試劑盒

MouseSmad7ELISAKit 小鼠信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子7(Smad7)pcr檢測試劑盒分裝

CLIAKitforHSL(Humanhormonesensitivelipase)ELISAKit人激素敏感性脂肪酶

細(xì)胞NADPH還原酶(NADPHCytochromeCReductase)活性比色法定量試劑盒20次

ELISAKitOrexinA大鼠阿立新A

豚鼠內(nèi)皮素1(ET-1)試劑盒

豚鼠免疫球蛋白G(IgG)試劑盒

豚鼠免疫球蛋白E(IgE)試劑盒

豚鼠免疫球蛋白A(IgA)試劑盒

鋅指蛋白186抗體

Irx3蛋白抗體

ERBB2重組大鼠 HER2 / ErbB2 蛋白 Protein

HMGB1 (High Mobility Group Box protein 1 0.5mgHMGB1 (High Mobility Group Box protein 1) 高遷移率族蛋白-1(抗原)

IL9重組人 IL-9 / Interleukin-9 蛋白 Protein

FKBP7 Protein Human 重組人 PPIase / FKBP7 蛋白

TFPI2 Protein Mouse 重組小鼠 TFPI2 / PP5 蛋?

PK-15 細(xì)胞專用培養(yǎng)基HMGB1 (High Mobility Group Box protein 1 0.5mgHMGB1 (High Mobility Group Box protein 1) 高遷移率族蛋白-1(抗原)

FKBP7 Protein Human 重組人 PPIase / FKBP7 蛋白

ERBB2重組大鼠 HER2 / ErbB2 蛋白 Protein

TFPI2 Protein Mouse 重組小鼠 TFPI2 / PP5 蛋白

IL9重組人 IL-9 / Interleukin-9 蛋白 Protein