細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺(tái)，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動(dòng)使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

3D4/21細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試，本產(chǎn)品可保持3D4/21細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含 3D4/21細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無(wú)需添加任何成分，可直接用于3D4/21 細(xì)胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

RPMI-1640 (含NaHCO3 1.5g/L) 基礎(chǔ)培養(yǎng)基                        445 ml

特級(jí)胎牛血清                                                                     ?

運(yùn)輸和保存

運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；?

注意事項(xiàng)：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來(lái)水沖洗即可。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動(dòng)使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)到80%~90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動(dòng)使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時(shí)后或過(guò)夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠中性粒細(xì)胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA pcr檢測(cè)試劑盒

Human ai ypsin (AT) ELISA Kit 人抗(AT)試劑盒

HumanglathioneS-ansferases,GSTpiELISAKit 人硫轉(zhuǎn)移酶pi基因(GSTpi)pcr檢測(cè)試劑盒分裝

CLIAKitforABCG2(HumanATP-bindingcassetteanspoerG2)ELISAKit人腺苷三0酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體G2

伊紅甲基藍(lán)(EMB)革蘭氏陰性細(xì)菌選擇瓊脂平板50個(gè)

Mouseniicoxidesyhase,NOSELISAKit小鼠合成酶(NOS)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠催乳素(PRL)試劑盒 ，英文名： PRL ELISA Kit

Porcine tumor necrosis factor alpha (TNF- alpha) ELISA Kit 豬腫瘤壞死因子α(TNF-α)試劑盒

ELISA 小鼠血管抑素(mouse Angiostatin) 分裝

CLIAKitforLNELISAKit大鼠層連蛋白/板層素

通用型DNA平滑末端連接克隆試劑盒(包括內(nèi)切酶)10次

ELISAKitIFN-β/IFNB雞β干擾素

血小板生成素   英文名稱：   Thromboietin   英文縮寫(xiě)：   TPO

總蛋白S   英文名稱：   total protein S   英文縮寫(xiě)：   TPS

壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體   英文名稱：   tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand   英文縮寫(xiě)：   AIL/APO 2L

壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體1   英文名稱：   tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand receptor 1   英文縮寫(xiě)：   AIL R1

eIF4A3蛋白抗體

端粒酶反轉(zhuǎn)錄酶抗體

PRLR重組大鼠 PRLR / Prolactin receptor 蛋白 Protein

HCV-Core 丙型肝病毒-C區(qū)(多肽 1mgHCV-Core 丙型肝病毒-C區(qū)(多肽)

CDK16重組人 CDK16 / PCTAIRE1 / PCTK1 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein

CCL1 Protein Human 重組人 I-309 / CCL1 / TCA-3 蛋白

CD6 Protein Mouse 重組小鼠 CD6 / TP120 蛋白

3D4/21 細(xì)胞專用培養(yǎng)基HCV-Core 丙型肝病毒-C區(qū)(多肽 1mgHCV-Core 丙型肝病毒-C區(qū)(多肽)

CCL1 Protein Human 重組人 I-309 / CCL1 / TCA-3 蛋白

PRLR重組大鼠 PRLR / Prolactin receptor 蛋白 Protein

CD6 Protein Mouse 重組小鼠 CD6 / TP120 蛋白

CDK16重組人 CDK16 / PCTAIRE1 / PCTK1 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein