P19 細(xì)胞專用培養(yǎng)基

產(chǎn)品介紹

P19細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持P19細(xì)胞最佳的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含 P19 細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于P19 細(xì)胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

MEMα基礎(chǔ)培養(yǎng)基                          445 ml

小牛血清                                    37.5 ml

特級胎牛血清                              12.5 ml

 運(yùn)輸和保存

運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；?

注意事項(xiàng)

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃；

2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱；

3) 戴上護(hù)目鏡，厚毛線手套后，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動凍存管以提高復(fù)溫速率；

4) 將融化了的凍存管中的細(xì)胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中，混勻后，1000rpm 離心 5min；

5) 準(zhǔn)備一個 T-25 培養(yǎng)瓶，寫上細(xì)胞名稱、日期，再加入 4ml 培養(yǎng)基；

6) 離心完成后棄去上清，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后，轉(zhuǎn)入 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)中，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。

傳代 （細(xì)胞傳代建議一傳二）

1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時，可進(jìn)行傳代。

2) 在生物安全柜內(nèi)，打開培養(yǎng)瓶瓶口，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基；

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后，水平放置培養(yǎng)瓶，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積，吸棄 PBS；

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中，將懸液吸入 15ml 離心管；

① 準(zhǔn)備一個無菌的 15ml 離心管，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基；

② 將消化下來的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右，輕拍培養(yǎng)瓶，95%左右細(xì)胞脫。

6) 1000rpm 離心 5min；

7) 準(zhǔn)備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶，各加入 4ml培養(yǎng)基。

8) 離心完成后，棄上清，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞，將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶，每個培養(yǎng)瓶各 1ml；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶，震蕩混勻后，將培養(yǎng)瓶置于 37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。 

凍存 （細(xì)胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后，棄上清，用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫；

9）第二天，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存。

小鼠0脂酶A2(PLA-2)pcr檢測試劑盒

Human common ace lymphocytic leukemia aigen (CALLA) ELISA Kit 人普通急性淋巴細(xì)胞白血病抗原(CALLA)試劑盒

HumanInvolucrin,iNVELISAKit 人套膜蛋白(iNV)pcr檢測試劑盒分裝

humanADAMmetallopeptidasewiththrombospondiype1motif4,ADAMTS4試劑盒人ADAM金屬肽酶含血小板反應(yīng)蛋白1基元4(ADAMTS4)試劑盒規(guī)格：96T/48T

脂質(zhì)過氧化物異構(gòu)前列腺素(ISOPROSTANE)ELISA定量測定試劑盒48/96次

Mouseamyloidbetapeptide1-40,Aβ1-40ELISAKit小鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠補(bǔ)體C3a(C3a)試劑盒 ，英文名： C3a ELISA Kit

Mouse plasmin inhibitor, alpha 2 (2-PI) ELISA Kit 小鼠α2纖溶酶抑制物(α2-PI)試劑盒

ELISA 小鼠紅細(xì)胞生成素受體(mouse EPOR) 分裝

CLIAKitforKLK6(HumanKallikrein6)ELISAKit人6

通用型產(chǎn)氣莢膜梭茵(Closidiumperfringens)試劑盒20次

ELISAKitcath-K大鼠組織蛋白酶K

小鼠結(jié)合珠蛋白試劑盒   小鼠結(jié)合珠蛋白試劑盒      小鼠結(jié)合珠蛋白試劑盒，，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠結(jié)合珠蛋白試劑盒、小鼠結(jié)合珠蛋白eisa試劑盒

小鼠鈣結(jié)合蛋白試劑盒   小鼠鈣結(jié)合蛋白試劑盒      小鼠鈣結(jié)合蛋白試劑盒，，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠鈣結(jié)合蛋白試劑盒、小鼠鈣結(jié)合蛋白eisa試劑盒

小鼠大內(nèi)皮素試劑盒   小鼠大內(nèi)皮素試劑盒      小鼠大內(nèi)皮素試劑盒，，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠大內(nèi)皮素試劑盒、小鼠大內(nèi)皮素eisa試劑盒

小鼠層連蛋白試劑盒   小鼠層連蛋白試劑盒      小鼠層連蛋白試劑盒，，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠層連蛋白試劑盒、小鼠層連蛋白eisa試劑盒

SLFN13蛋白抗體

角化蛋白S100A18抗體

CADM3重組大鼠 CADM3 / NECL1 / IGSF4B 蛋白 Protein

H1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin 0.5mgH1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin) 流感病毒A抗原

TNFSF13B重組人 BLyS / TNFSF13B / BAFF 蛋白 Protein

CXCL5 Protein Human 重組人 CXCL5 蛋白

UCHL3 Protein Mouse 重組小鼠 UCHL3 / UCH-L3 蛋白

P19 細(xì)胞專用培養(yǎng)基H1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin 0.5mgH1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin) 流感病毒A抗原

CXCL5 Protein Human 重組人 CXCL5 蛋白

CADM3重組大鼠 CADM3 / NECL1 / IGSF4B 蛋白 Protein

UCHL3 Protein Mouse 重組小鼠 UCHL3 / UCH-L3 蛋白

TNFSF13B重組人 BLyS / TNFSF13B / BAFF 蛋白 Protein

?無菌操作?：細(xì)胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進(jìn)行，使用前需對超凈工作臺進(jìn)行紫外線照射滅菌，定期清潔培養(yǎng)箱。實(shí)驗(yàn)人員需更換工作服、鞋套，戴口罩、手套。

?器材滅菌?：玻璃器皿、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液、血清、緩沖液等試劑應(yīng)無菌、無污染，使用前需進(jìn)行無菌檢測。不同細(xì)胞對培養(yǎng)液成分要求有差異，應(yīng)按細(xì)胞類型選擇合適培養(yǎng)液。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動物細(xì)胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃，偏差應(yīng)控制在±0.5℃。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性，定期檢查氣體濃度與流量，細(xì)胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化。

?定期檢測?：定期對細(xì)胞進(jìn)行支原體、細(xì)菌、真菌等污染檢測。