細胞實驗步驟：

一、細胞復蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風30min；

2.預熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞，將細胞懸液轉移到培養(yǎng)瓶內，補加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻，并做好標記；

13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態(tài)；

14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

大鼠原代小腸隱窩上皮細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經過長期測試，本產品可保持大鼠原代小腸隱窩上皮細胞最佳的生長狀態(tài)。

本產品中已包含大鼠原代小腸隱窩上皮細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于大鼠原代小腸隱窩上皮細胞的培養(yǎng)。

注意事項：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內部；這部分有害物質的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

公司正在出售的產品：

E.coli DH-5 Alpha(E.coli DH-5 Alpha Protein 0.5mgE.coli DH-5 Alpha(E.coli DH-5 Alpha Protein) DH 5 alpha 大腸桿菌菌體蛋白

CD8B Protein Human 重組人 CD8B / P37 / LEU2 蛋白 (Fc 標簽)

MPL重組大鼠 c-MPL / CD110 / TPOR 蛋白 Protein

IFNAR1 Protein Mouse 重組小鼠 IFNAR1 / IFNAR 蛋白

LTF重組人 Lactotransferrin / LTF 蛋白 Protein

大鼠低密度脂蛋白免疫復合物(LDL-IC)試劑盒 ，英文名： LDL-IC ELISA Kit

Pig hea muscle oponin I (cTn- I) ELISA Kit 豬心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)試劑盒

鉤端核酸試劑盒(熒光PCR法) 48T

CLIAKitforLR/Ob-R(HumanLeptieceptor)ELISAKIT人苗條素受體

通用封阻緩沖液100毫升

ELISAKitAT-Ⅲ雞抗Ⅲ抗體

小鼠血管內皮細胞生長因子B(mouse VEGF-B)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

小鼠血管內皮細胞生長因子C(mouse VEGF-C)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

小鼠血管內皮細胞生長因子D(mouse VEGF-D)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

小鼠血管內皮細胞生長因子受體1(mouse VEGF-R1)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

小鼠纖維蛋白肽B(FPB)試劑盒 96T/48T

Human leucine aminopepridase (LAP) ELISA Kit 人亮氨酰氨基肽酶(LAP)試劑盒

Humanlipoteichoicacids,LTAELISAKit 人脂0壁酸(LTA)試劑盒 96T/48T 進口分裝

ChickenfactorB,BF試劑盒雞B因子(BF)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細胞CASPASE-4蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MousehepatitisBviruseaibody,HBeAbELISAKit小鼠乙型肝e抗體(HBeAb)試劑盒規(guī)格：96T/48T

26S蛋白酶體非ATP酶調節(jié)亞基11抗體

Tyrosine Hydroxylase

大鼠原代小腸隱窩上皮細胞專用培養(yǎng)基MPL重組大鼠 c-MPL / CD110 / TPOR 蛋白 Protein

E.coli DH-5 Alpha(E.coli DH-5 Alpha Protein 0.5mgE.coli DH-5 Alpha(E.coli DH-5 Alpha Protein) DH 5 alpha 大腸桿菌菌體蛋白

LTF重組人 Lactotransferrin / LTF 蛋白 Protein

CD8B Protein Human 重組人 CD8B / P37 / LEU2 蛋白 (Fc 標簽)

IFNAR1 Protein Mouse 重組小鼠 IFNAR1 / IFNAR 蛋白

細胞培養(yǎng)步驟：

?細胞復蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細胞傳代?：

當細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當細胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補加新鮮培養(yǎng)基。

做好標記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉移到冷凍保存管中，標記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉至液氮罐保存。