021-39921927
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
WPMY-1 (正常前列腺基質(zhì)永生化細(xì)胞) 的相關(guān)*：細(xì)胞IL蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒 10/50 次細(xì)胞IL蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒 10/50 次IL蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒 5次IL蛋白免疫共沉淀分析試劑盒 5次IL蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒 25次細(xì)胞ERK蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測(cè)試劑盒 10/20次
產(chǎn)品分類
| 品牌 | 其他品牌 | 貨號(hào) | GOY-01X0463 |
|---|---|---|---|
| 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| WPMY-1 (正常前列腺基質(zhì)永生化細(xì)胞) | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0463 |
商品介紹：
名稱 WPMY-1 (正常前列腺基質(zhì)永生化細(xì)胞) 別稱WPMY1 種屬人類 年齡（性別）男性，54歲 組織來(lái)源前列腺/基質(zhì) 生長(zhǎng)特性貼壁細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài)成肌細(xì)胞樣 背景描述肌成纖維基質(zhì)細(xì)胞株，WPMY-1細(xì)胞與RWPE-1細(xì)胞一樣，來(lái)源于同一張成人前列腺組織切片的周圍區(qū)域的基質(zhì)細(xì)胞。通過(guò)一個(gè)pRSTV質(zhì)料結(jié)構(gòu)，用SV40大T抗原對(duì)基質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行永生化。WPMY-1細(xì)胞與RWPE-1細(xì)胞及其它上皮細(xì)胞衍生株一樣，屬于來(lái)源于同一個(gè)前列腺的一系列細(xì)胞株。由于WPMY-1細(xì)胞與RWPE-1細(xì)胞來(lái)源于同一個(gè)前列腺的周圍區(qū)域，WPMY-1細(xì)胞株對(duì)于研究分泌和基質(zhì)與上皮細(xì)胞相互作用尤其有用。據(jù)提供者報(bào)道，來(lái)源于同一個(gè)前列腺的RWPE-1細(xì)胞株，經(jīng)過(guò)檢測(cè)，乙肝、丙肝、人免疫缺陷病毒都呈陰性。 生物安全等級(jí)2 生長(zhǎng)培養(yǎng)基DMEM＋5% FBS＋1% P/S 推薦傳代比例1:3-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 凍存條件 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ |
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
STAMBP 基因全長(zhǎng)ORF克隆
BCS1L 基因全長(zhǎng)ORF克隆
GMPPA 基因全長(zhǎng)ORF克隆
PSMC5 基因全長(zhǎng)ORF克隆
LANCL1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
STOML1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CCDC130 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CBWD1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
EFCAB4B 基因全長(zhǎng)ORF克隆
MAT2A 基因全長(zhǎng)ORF克隆
WPMY-1 (正常前列腺基質(zhì)永生化細(xì)胞) 250mL PEG-LiOAc Solution PEG-LiOAc Solution 常溫保存
0.1mL×10 HB101化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 HB101 Competent Cell -80℃保存
2 ug pNN_v2 pNN_v2 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
1/4MS培養(yǎng)基（不含瓊脂和蔗糖） 1/4 MS Medium(without agar or sucrose) 250g
1瓶 THP-1細(xì)胞株 THP-1 低溫運(yùn)輸和保存
T1N0肉湯 TIN0 Broth 250g
5g Folic Acid 4℃避光保存
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