細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺(tái)，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動(dòng)使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

小鼠原代腦微血管周細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試，本產(chǎn)品可保持小鼠原代腦微血管周細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含小鼠原代腦微血管周細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于小鼠原代腦微血管周細(xì)胞的培養(yǎng)。

注意事項(xiàng)：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動(dòng)使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)到80%~90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動(dòng)使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時(shí)后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

豬血管生成素受體Tie2(ANG-R-Tie2)ELISA 試劑盒

Human creatine kinase (CK) ELISA Kit 人肌酸激酶(CK)試劑盒

RabbitD-Dimer,D2DELISAKit 兔子D二聚體(D2D)試劑盒分裝

CLIAKitforai-RVIgG(Humanai-rubellavirusIgGaibody)ELISAKit人抗風(fēng)疹病毒IgG抗體

血液3-羥-3-甲戊二酰(HMG-COA)還原酶活性間接比色法定量試劑盒20次

PorcineInsulin,INSELISAKit豬胰島素(INS)試劑盒

大鼠活化蛋白C(APC)試劑盒 ，英文名： APC ELISA Kit

Rabbit Leptospira IgG (Lebtospira) ELISA Kit 兔鉤端IgG(Lebtospira)試劑盒

腦膜奈瑟菌通用型(NM-U)核酸試劑盒 48T

CLIAKitforMouseneurofilameprotein,NFELISAKit小鼠神經(jīng)絲蛋白

體液(GLATHIONE)總濃度熒光定量試劑盒50次

ELISAKitColⅡ人Ⅱ型膠原

豬胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)ELISAKit   ELISA. 

豬胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)ELISAKit   ELISA. 

豬胰島素(INS)ELISAKit   ELISA. 

豬血小板活化因子(PAF)ELISAKit   ELISA.

FSCB蛋白抗體

KYNU重組小鼠 KYNU / Kynureninase 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

TGFβ誘導(dǎo)早期應(yīng)答基因1(TIEG1)重組蛋白 Recombinant TGF Beta Inducible Early Response Gene 1 (TIEG1)

RUVBL1重組人 RUVBL1 / RVB1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

BLK Protein Human 重組人 BLK / B Lymphocyte Kinase 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

MET Protein Cyno

小鼠原代腦微血管周細(xì)胞專用培養(yǎng)基C4結(jié)合蛋白β(C4BPβ)重組蛋白 Recombinant C4 Binding Protein Beta (C4BPb)

BLK Protein Human 重組人 BLK / B Lymphocyte Kinase 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

ADAM15重組小鼠 ADAM15 / MDC15 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

DLL1 Protein Rat 重組大鼠 DLL1 / Delta-like 蛋白 1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

LILRA3重組人 ILT6 / LILRA3 蛋白  Protein