細胞實驗步驟：

一、細胞復蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風30min；

2.預熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞，將細胞懸液轉移到培養(yǎng)瓶內，補加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻，并做好標記；

13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態(tài)；

14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

人原代Ⅱ型肺泡上皮細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持人原代Ⅱ型肺泡上皮細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含人原代Ⅱ型肺泡上皮細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于人原代Ⅱ型肺泡上皮細胞的培養(yǎng)。

注意事項：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內部；這部分有害物質的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細胞培養(yǎng)步驟：

?細胞復蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細胞傳代?：

當細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當細胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補加新鮮培養(yǎng)基。

做好標記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉移到冷凍保存管中，標記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠釋放激素(GH)ELISA pcr檢測試劑盒

Rat calf iestine alkaline phosphatase (CIAP) ELISA Kit 大鼠牛小腸堿性0酸酶(CIAP)試劑盒

HumanSerumamyloidA,SAAELISAKit 人血清淀粉樣蛋白A(SAA)pcr檢測試劑盒分裝

Humanbasicfibroblastgrowthfactor,bFGF試劑盒人堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物質粒菌化試劑盒20次

HumaerminalcomplemecomplexC5b-9,TCCC5b-9ELISAKit人末端補體復合物C5b-9(TCCC5b-9)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠斯鈣素1(STC1)試劑盒 ，英文名： STC1 ELISA Kit

Mouse deoxypyridinoline / deoxypyridinoline (DPD) ELISA Kit 小鼠脫氧酚/脫氧啉(DPD)試劑盒

ratNoradrenaline,NAELISAKit 大鼠去甲(NA)pcr檢測試劑盒分裝

CLIAKitforHIF-1Alpha(Mousehypoxia-induciblefactor1Alpha)ELISAKit小鼠低氧誘導因子1α

細胞RSK1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKit26SPSM大鼠26S蛋白酶體

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豚鼠免疫球蛋白E試劑盒   豚鼠免疫球蛋白E試劑盒      豚鼠免疫球蛋白E試劑盒，，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠免疫球蛋白E試劑盒、豚鼠免疫球蛋白Eeisa試劑盒

豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物試劑盒   豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物試劑盒      豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物試劑盒，，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物試劑盒、豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物eisa試劑盒

豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復合物試劑盒   豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復合物試劑盒      豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復合物試劑盒，，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復合物試劑盒、豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復合物eisa試劑盒

原鈣粘蛋白β4抗體

RNA結合蛋白9抗體

ACPP重組小鼠 Prostatic Acid Phosphatase / ACPP 蛋白 Protein

半乳糖凝集素4(GAL4)重組蛋白 Recombinant Galectin 4 (GAL4)

AK4重組人 AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L1 蛋白 Protein

FLRT1 Protein Human 重組人 FLRT1 蛋白

IFNGR1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 蛋白

人原代Ⅱ型肺泡上皮細胞專用培養(yǎng)基AMH/MIS Muellerian抑制因子抗原 1mgAMH/MIS Muellerian抑制因子抗原

FLRT1 Protein Human 重組人 FLRT1 蛋白

LY9重組小鼠 LY9 / CD229 / SLAMF3 蛋白 Protein

HEPACAM2 Protein Rat 重組大鼠 HepaCAM2 蛋白

ANGPTL4重組人 ANGPTL4 蛋白 (Fc 標簽) Protein