細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺(tái)，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動(dòng)使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

人乳腺上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持人乳腺上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含人乳腺上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于人乳腺上皮細(xì)胞永生化 細(xì)胞的培養(yǎng)。

上皮細(xì)胞培養(yǎng)體系          500 ml

產(chǎn)品主要成分

上皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基                              480 ml

上皮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑                              5 ml

運(yùn)輸和保存

運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；?

注意事項(xiàng)：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動(dòng)使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長到80%~90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動(dòng)使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時(shí)后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠解脲脲原體抗體(UU-Ab)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human papilloma virus aibody (HPV) ELISA Kit 人狀瘤病毒抗體(HPV)試劑盒

HumanfibromodulinELISAKit 人纖調(diào)蛋白(fibromodulin)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanai-cardiolipinaibodyIgA,ACA-IgA試劑盒人抗心0脂抗體IgA(ACA-IgA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物核同糖1,5二0酸羧化/加氧酶(RUBPCase/Rubisco)羧化活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量試劑盒20次

Humanα-galactoyl,GalELISAKit人α半乳糖基抗體(Gal)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠纖維蛋白肽B(FPB)試劑盒 ，英文名： FPB ELISA Kit

Mouse chorionic gonadoopin (CG) ELISA Kit 小鼠絨毛膜(CG)試劑盒

Mousemaixmetalloproteinase5,MMP-5ELISAKit 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHuman2,3-dinohromboxaneB2,2,3-dinor-TXB2ELISAKit人2,3Dinor血栓烷B2

細(xì)胞HSV(HERPESSIMPLX)病毒定性試劑盒20次

ELISAKitEGF大鼠表皮生長因子

小鼠補(bǔ)體片斷3b(C3b)試劑盒   96T/48T

小鼠補(bǔ)體片斷3a(C3a)試劑盒   96T/48T

小鼠補(bǔ)體片段3b受體(C3bR)試劑盒   96T/48T

小鼠補(bǔ)體蛋白4(C4)試劑盒   96T/48T

晚期糖基化終末產(chǎn)物抗體

EHBP1L1蛋白抗體

NRP1重組食蟹猴 Neuropilin-1 / NRP1 蛋白 Protein

IL-2 (Interleukin-2 0.5mgIL-2 (Interleukin-2)Mouse、Ret 白介素2抗原(大、小鼠)

PDE4B重組人 PDE4B / DPDE4 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

DPEP1 Protein Human 重組人 Dehydropeptidase-I / DPEP1 蛋白

CHI3L1 Protein Mouse 重組小鼠 CHI3L1 / YKL40 / 屬

人乳腺上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基半乳糖凝集素1(GAL1)重組蛋白 Recombinant Galectin 1 (GAL1)

FAM3D Protein Human 重組人 FAM3D 蛋白 (His 標(biāo)簽)

NAALADL1重組小鼠 NAALADL1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

FGFR4 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白 (His 標(biāo)簽)

ERN1重組人 ERN1 / IRE1 蛋白 (aa 465-977) Protein