細(xì)胞實驗步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

SUM159PT細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持SUM159PT細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含SUM159PT細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于SUM159PT細(xì)胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

RPMI-1640基礎(chǔ)培養(yǎng)基                             445 mL

特級胎牛血清                                            50 mL

運(yùn)輸和保存

運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；?

注意事項：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長到80%~90%時，進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

豬總蛋白(TPS)試劑盒

Human nuclear maix protein 22 (NMP-22) ELISA Kit 人核基質(zhì)蛋白22(NMP-22)試劑盒

Rabbitplasmin-aiplasmincomplex,PAPELISAKit 兔纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)試劑盒分裝

CLIAKitforApo-E(HumanApolipoproteinE)ELISAKit人載脂蛋白E

血白細(xì)胞分離試劑盒10/50/100次

Porcinemelanomametastasissurfaceadhesionmolecule,MMSAMELISAKit豬黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)試劑盒

大鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)試劑盒 ，英文名： NF-κB p65 ELISA Kit

Rabbit heat shock protein 70 (HSP-70) ELISA Kit 兔熱休克蛋白70(HSP-70)試劑盒

嗜肺軍團(tuán)桿菌(LP)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMouseBeta-catenin,Beta-catELISAKit小鼠β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白

體液肌酸激酶(CK)總活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量試劑盒20次

2D3/DVD/DHVD3OH人1,25二羥基D3

總鐵快速測試盒   Total iron rapid test case

錳快速測試盒   Manganese rapid test case

鎳快速測試盒   Nickel rapid test case

PH值快速測試盒   PH quick test case

NACA2蛋白抗體

細(xì)胞周期蛋白3抗體

BCAM重組小鼠 BCAM 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

癌胚抗原(CEA)重組蛋白 Recombinant Carcinoembryonic Antigen (CEA)

GSTZ1重組人 GSTZ1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

C1QBP Protein Human 重組人 HABP1 / C1QBP / GC1QBP 蛋白 (His 標(biāo)簽)

FGFR1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 FGFR1 / CD331 蛋白 (His 標(biāo)簽)

SUM159PT 細(xì)胞專用培養(yǎng)基谷半胱連接酶(GCLM)重組蛋白 Recombinant Glutamate Cysteine Ligase, Modifier Subunit (GCLM)

C1QBP Protein Human 重組人 HABP1 / C1QBP / GC1QBP 蛋白 (His 標(biāo)簽)

HAVCR2重組小鼠 TIM-3 / HAVCR2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

IL13 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL13 / ALRH 蛋白

SPHK1重組人 SPHK1 / Sphingosine Kinase 1 蛋白 Protein