細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺(tái)，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動(dòng)使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

SK-MEL-2+luc細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試，本產(chǎn)品可保持      SK-MEL-2+luc     細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含      SK-MEL-2+luc     細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無(wú)需添加任何成分，可直接用于      SK-MEL-2+luc     細(xì)胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

MEM 基礎(chǔ)培養(yǎng)基                      445ml

特級(jí)胎牛血清                        50 ml

運(yùn)輸和保存

運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；?

注意事項(xiàng)：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來(lái)水沖洗即可。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動(dòng)使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)到80%~90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動(dòng)使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時(shí)后或過(guò)夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠膠原酶Ⅲ(Collagenase Ⅲ)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat granzyme A (Gzms-A) ELISA Kit 大鼠顆粒酶A(Gzms-A)試劑盒

Humankillercellimmnoglobulin-likereceptor,KIRELISAKit 人殺傷細(xì)胞免疫球蛋白樣受體(KIR)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanai-cytomegalovirusIgMaibody,ai-CMVIgM試劑盒人胎兒血紅蛋白(HBF)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物基因組DNA化試劑盒(低多糖/酚)50次

Humanα1-Acidglycoprotein，α1-AGPELISAKit人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠整合素αM(ITGαM)試劑盒 ，英文名： ITGαM ELISA Kit

Mouse Clara cell protein (CC16) ELISA Kit 小鼠克拉拉細(xì)胞蛋白(CC16)試劑盒

MouseIerleukin12,IL-12/P70ELISAKIT 小鼠白介素12(IL-12/P70)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanGlycatedhemoglobinA1c,A1cELISAKit人糖化血紅蛋白A1c

無(wú)去垢劑裂解液用于物理裂解

ELISAKitTG大鼠甲狀腺球蛋白

小鼠CD3分子(CD3)ELISAKit   ELISA. 

小鼠小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)ELISAKit   ELISA. 

小鼠小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體2(AFP-L2)ELISAKit   ELISA. 

小鼠小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體1(AFP-L1)ELISAKit   ELISA.

辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的脫氧核糖核酸酶γ抗體

鋅指蛋白660抗體

IL1R1重組食蟹猴 IL1R1 蛋白 Protein

Integrin Alpha3 整合素α3抗原 0.5mgIntegrin Alpha3 整合素α3抗原

EPHA4重組人 EphA4 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

DARS Protein Human 重組人 DARS 蛋白

SERPINI1 Protein Mouse 重組小鼠 SerpinI1 / Neuroserpin 蛋白

SK-MEL-2+luc 細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基TLR3 (Toll-like receptor 3 0.5mgTLR3 (Toll-like receptor 3) Toll樣受體3抗原

CSF1 Protein Human 重組人 M-CSF / CSF-1 蛋白

RSV-G重組人類(lèi)呼吸道合胞病毒 hRSV (A, rsb1734) glycoprotein G / RSV-G 蛋白 (93% Homology) Protein

SDF2 Protein Human 重組人 SDF2 蛋白

GFPT1重組人 GFPT1 / GFAT 蛋白 Protein