細胞實驗步驟：

一、細胞復蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風30min；

2.預熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞，將細胞懸液轉移到培養(yǎng)瓶內，補加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻，并做好標記；

13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態(tài)；

14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產品介紹

人臍靜脈內皮原代細胞+GFP細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經過長期測試，本產品可保持人臍靜脈內皮原代細胞+GFP細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產品中已包含人臍靜脈內皮原代細胞+GFP細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于人臍靜脈內皮原代細胞+GFP細胞的培養(yǎng)。

內皮細胞培養(yǎng)體系          500 ml

產品主要成分

內皮細胞基礎培養(yǎng)基                         465 ml

內皮細胞培養(yǎng)添加劑                         5 ml

特級胎牛血屬

運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；?

注意事項：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內部；這部分有害物質的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細胞培養(yǎng)步驟：

?細胞復蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細胞傳代?：

當細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當細胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補加新鮮培養(yǎng)基。

做好標記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉移到冷凍保存管中，標記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉至液氮罐保存。

公司正在出售的產品：

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Rat glucocoicoid receptor alpha (GR- alpha) ELISA Kit 大鼠糖皮質激素受體α(GR-α)試劑盒

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HumancoagulationfactorⅢ,FⅢ試劑盒人Ⅲ(FⅢ)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組蛋白脫乙?；?/span>6(HDAC6)活性比色法定量試劑盒20次

Humaetinoicacidinduciblegene/RIG-likereceptor,RLR-9ELISAKit人酸誘導基因/RIG-1樣受體(RLR)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠轉縮酶(TALDO1)試劑盒 ，英文名： TALDO1 ELISA Kit

Mice of aithrombin III (AT- III) aibody ELISA Kit 小鼠抗Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)試劑盒

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氨基酸補充溶液(10X)100毫升

ELISAKitATGA/TGAB大鼠抗甲狀腺球蛋白抗體

小鼠內皮脂肪酶(EL)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

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天門冬氨酰tRNA連接酶2抗體

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FCGR3B重組人 CD16b / FCGR3B 蛋白 Protein

GUCA1A Protein Human 重組人 GCAP1 屬

人臍靜脈內皮原代細胞+GFP 細胞專用培養(yǎng)基Beta-Amyloid(1-40 0.1mgBeta-Amyloid(1-40) β淀粉樣肽(1-40)(多肽蛋白)

HDAC3 Protein Human 重組人 HDAC3 / Histone deacetylase 3 蛋白 (His & GST 標簽)

JAM3重組小鼠 JAM3 / JAM-C 蛋白 Protein

ICOS Protein Rat 重組大鼠 ICOS / AILIM / CD278 蛋白 (Fc 標簽)

DCX重組人 DCX 蛋白 (aa 45-150, GST 標簽) Protein