細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺(tái)，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動(dòng)使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

E0771細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持E0771細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含E0771細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于E0771 細(xì)胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

DMEM 基礎(chǔ)培養(yǎng)基                              445 mL

特級(jí)胎牛血清                                   50 mL

運(yùn)輸和保存

運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；?

注意事項(xiàng)：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動(dòng)使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長到80%~90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動(dòng)使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時(shí)后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠(Cyt-C)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human lymphocyte chemotactic factor (Lptn/LTN/XCL1) ELISA Kit 人淋巴細(xì)胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)試劑盒

HumanAcetylcholinesterase,AChEELISAKit 人乙酰酯酶(AChE)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

ChickenImmunoglobulinG,IgG試劑盒雞免疫球蛋白G(IgG)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞CYP2B1蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MouseGrowthHormoneReleasingPeptide,GHRPELISAKit小鼠生長激素釋放多肽(GHRP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人總抗氧化能力( T-AOC) ELISA 試劑盒

Rat adiponectin (ADP) ELISA Kit 大鼠脂聯(lián)素(ADP)試劑盒

HumanGlucosedependeinsulieleasingpolypeptide,GIPELISAKit 人葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)試劑盒 進(jìn)口分裝

Humanheparinassociatedaibody,HIT試劑盒人抗肝素PF4復(fù)合物抗體/HIT抗體(HIT)試劑盒

組織肝脂酶活性比色法定量試劑盒20次

humanmajorvaultprotein,MVPELISAKit人主要穹窿蛋白(MVP)試劑盒

人粘蛋白6(MUC6)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human MUC6 (Mucin 6) ELISA Kit

人肌球蛋白結(jié)合蛋白C(MYBPC3)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human MYBPC3 (Myosin Binding Protein C, Cardiac) ELISA Kit

人肌球蛋白重鏈10(MYH10)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human MYH10 (Myosin Heavy Chain 10, Non Muscle) ELISA Kit

人肌球蛋白重鏈9(MYH9)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human MYH9 (Myosin Heavy Chain 9, Non Muscle) ELISA Kit

垂體特異性同源因子抗體

尿皮素2抗體

PVRL1重組大鼠 CD111 / Nectin-1 / PVRL1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

Gastrin(human 0.5mgGastrin(human)peptide(1-17) 胃泌素/蛙皮素(多肽人源)

F7重組人 Coagulation Factor VII / FVII / F7 蛋白 Protein

IZUMO4 Protein Human 重組人 IZUMO4 / C19orf36 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

ACE2 Protein Mouse 重組小鼠 ACE2 / Ang???

E0771 細(xì)胞專用培養(yǎng)基Defensin Beta2/beta-defensin 2/BD-2(mouse 0.5mgDefensin Beta2/beta-defensin 2/BD-2(mouse) 防御素β2抗原(小鼠)

ADCYAP1R1 Protein Human 重組人 ADCYAP1R1 蛋白

PROM1重組大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

CD200R4 Protein Mouse 重組小鼠 CD200R4 / CD200 Receptor 4 / CD200RLa 蛋白

APP重組人 Beta-amyloid 42 / Beta-APP42 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein