細(xì)胞實驗步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

HSF(SV40)細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持HSF(SV40)細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含 HSF(SV40) 細(xì)胞生長所需的各種成分無需添加任何成分，可直接用于HSF(SV40) 細(xì)胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

推薦原代成纖維細(xì)胞培養(yǎng)體系500ml

名稱

原代成纖維細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基

原代成纖維細(xì)胞培養(yǎng)添加劑

胎牛血清（FBS）

運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；?

注意事項：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長到80%~90%時，進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠細(xì)胞色素氧化酶(CC0)試劑盒 96T/48T

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Humanfibronectioelatedaigen,FRAELISAKit 人纖維連接素相關(guān)抗原(FRA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

ChickenImmunoglobulinE,IgE試劑盒雞免疫球蛋白E(IgE)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞CYP1A2蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次

Mousegrowthhormonereleasingpeptide-Ghrelin,GHRP-GhrelinELISAKit小鼠生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)試劑盒規(guī)格：96T/48T

豚鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)試劑盒 ，英文名： IL1Ra ELISA Kit

Human ubiquitin activating enzyme (E1/UBAE) ELISA Kit 人泛素激活酶(E1/UBAE)試劑盒

rabbitIerleukin4,IL-4ELISAKit 兔子白介素4(IL-4)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforBeta-CG(MouseChorionicGonadoophinBeta)ELISAKit小鼠絨毛膜β

細(xì)菌乙醇比色法定量試劑盒20次

Rabbitglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit兔子神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人脂0壁酸試劑盒   人脂0壁酸試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人脂0壁酸試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人脂0壁酸試劑盒、人脂0壁酸試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

人脂聯(lián)素試劑盒   人脂聯(lián)素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人脂聯(lián)素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人脂聯(lián)素試劑盒、人脂聯(lián)素試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

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OPA1L蛋白抗體

跨膜蛋白109抗體

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凋亡相關(guān)因子配體(FASL)重組蛋白 Recombinant Factor Related Apoptosis Ligand (FASL)

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AK4 Protein Human 重組人 AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

IGFBP3 Protein Cynomolgu???

HSF(SV40轉(zhuǎn)染) 細(xì)胞專用培養(yǎng)基ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin 0.1mgShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Gln11) ?？窠?jīng)毒素(35肽)

IL5 Protein Human 重組人 IL5 / Interleukin 5 蛋白

HA重組甲型流感 H5N1 (A/duck/Laos/3295/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

LXN Protein Human 重組人 Latexin / LXN / TCI 蛋白

SERPINF1重組人 SerpinF1 / PEDF 蛋白 Protein