細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺(tái)，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動(dòng)使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

P815細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試，本產(chǎn)品可保持P815細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含 P815 細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無(wú)需添加任何成分，可直接用于P815 細(xì)胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

RPMI-1640 基礎(chǔ)培養(yǎng)基                                 445 ml

特級(jí)胎牛血清                                            50 mL

運(yùn)輸和保存

運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；?

注意事項(xiàng)：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來(lái)水沖洗即可。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動(dòng)使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)到80%~90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動(dòng)使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時(shí)后或過(guò)夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

豚鼠腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)試劑盒 ，英文名： BDNF ELISA Kit

Human paraneoplastic pemphigus aibody (PNP) ELISA Kit 人副性天皰瘡抗體(PNP)試劑盒

rabbitImmunoglobulinE,IgEELISAKit 兔子免疫球蛋白E(IgE)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforBALPELISAKit大鼠骨堿性0酸酶

線蟲β-半乳糖苷酶原位染色試劑盒50次

Rabbitcholesterolesteransferprotein,CETPELISAKit兔子酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠Ⅹ(FⅩ)ELISA 試劑盒

Rat alpha fetoprotein / alpha fetoprotein (AFP) ELISA Kit 大鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)試劑盒

Humanimmunosuppressiveacidicprotein,IAPELISAKit 人免疫抑制酸性蛋白(IAP)試劑盒 進(jìn)口分裝

Human16-αHydroxyesogen1,16-αOHE-1試劑盒人16α羥基雌同1(16-αOHE-1)試劑盒

真菌/酵母細(xì)胞線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒20次

MouseAquaporin2,AQP-2ELISAKit小鼠水通道蛋白2(AQP-2)試劑盒

人周期素依賴性激酶1(CDK1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒   Human CDK1 (Cyclin Depende Kinase 1) ELISA Kit

人周期素依賴性激酶2(CDK2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒   Human CDK2 (Cyclin Depende Kinase 2) ELISA Kit

人周期素依賴性激酶4(CDK4)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒   Human CDK4 (Cyclin Depende Kinase 4) ELISA Kit

人周期素依賴性激酶5(CDK5)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒   Human CDK5 (Cyclin Depende Kinase 5) ELISA Kit

HRAS1抗體

甲基化樣蛋白7A抗體

IL8重組狗 IL-8 / CXCL8 蛋白 Protein

OAT-1 (Organic anion transporter 1 0.5mgOAT-1 (Organic anion transporter 1)mouse、rat 陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1(大、小鼠同源：人源見(jiàn)bs-0606P)

CA2重組人 Carbonic Anhydrase II / CA2 蛋白 Protein

CEBPG Protein Human 重組人 CEBPG / CEBP gamma 蛋白

S100A4 Protein Mo???

P815  細(xì)胞專用培養(yǎng)基GRP( Gastrin Releasing Peptide 0.5mgGRP( Gastrin Releasing Peptide ) 促胃泌素釋放肽(抗原)

ABHD14B Protein Human 重組人 ABHD14B 蛋白 (His 標(biāo)簽)

IFNG重組大鼠 IFNG / Interferon Gamma 蛋白  Protein

CD83 Protein Mouse 重組小鼠 CD83 / HB15 蛋白 (His 標(biāo)簽)

FETUB重組人 Fetuin-B / FETUB 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein