細胞實驗步驟：

一、細胞復蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風30min；

2.預熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞，將細胞懸液轉移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻，并做好標記；

13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態(tài)；

14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

SKNO-1細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持SKNO-1細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含SKNO-1細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于SKNO-1細胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

RPMI-1640 基礎培養(yǎng)基                               445 mL

特級胎牛血清                                               50 mL

運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；?

注意事項：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細胞培養(yǎng)步驟：

?細胞復蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細胞傳代?：

當細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當細胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補加新鮮培養(yǎng)基。

做好標記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉移到冷凍保存管中，標記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

植物A(VA)ELISA 試劑盒

Human ai nuclear aibody (ANA) ELISA Kit 人抗核抗體(ANA)試劑盒

Porcineplateletactivatingfactor,PAFELISAKit 豬血小板活化因子(PAF)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforaFGF-1(Humanacidicfibroblastgrowthfactor1)ELISAKit人酸性成纖維細胞生長因子1

血液血管緊張素Ⅰ轉化酶1(ACE1)活性熒光共振能量轉移法(FRET)定量試劑盒20次

MouseterminalcomplemecomplexC5b-9,TCCC5b-9ELISAKit小鼠末端補體復合物C5b-9(TCCC5b-9)試劑盒

小鼠α干擾素(IFN-α)ELISA 試劑盒

Rat aquaporin 1 (AQP-1) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白1(AQP-1)試劑盒

HumanNeonatalThyroidStimulatingHormone,N-TSHELISAKit 人新生兒促甲狀腺素(N-TSH)試劑盒 進口分裝

HumanChorionicGonadoophinβ,β-CG試劑盒人絨毛膜β(β-CG)試劑盒

總微型RNA(miRNA)超濾法分離試劑盒10次

HumanSalusinαELISAKit人Salusin-α試劑盒

脂褐質測試盒   Lipfuscin test box

脂蛋白（a）[LP（a）]測試盒   Lipoprotein (a) [LP (a)] test case

游離脂肪酸（NEFA）測試盒   Free fatty acid (NEFA) test case

脂肪酶測試盒   Lipase test kit

FLJ36492蛋白抗體

環(huán)指蛋白19抗體

CLEC14A重組小鼠 CLEC14A / EGFR-5 蛋白 (His 標簽) Protein

CD146/MCAM 黑色素瘤細胞粘附分子CD146抗原 0.5mgCD146/MCAM 黑色素瘤細胞粘附分子CD146抗原

PHOSPHO1重組人 PHOSPHO1 蛋白 (His 標簽) Protein

ALDH3A1 Protein Human 重組人 ALDH3A1 蛋白 (His 標簽)

EPHA3 Protein Rat 重組大鼠 EphA3 蛋白 (His 標簽)

SKNO-1 細胞專用培養(yǎng)基催乳素(PRL)重組蛋白 Recombinant Prolactin (PRL)

IL2 Protein Human 重組人 Interleukin-2 / IL-2 蛋白

WIF1重組小鼠 WIF1 / WIF-1 蛋白 Protein

NT5E Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD73 / NT5E 蛋白

BTK重組人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 蛋白 Protein