細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺(tái)，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動(dòng)使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

OP9細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持OP9細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含 OP9 細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于OP9 細(xì)胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

MEMα基礎(chǔ)培養(yǎng)基                          395ml

特級(jí)胎牛血清                             100 ml

運(yùn)輸和保存

運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；?

注意事項(xiàng)：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動(dòng)使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長到80%~90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動(dòng)使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時(shí)后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)試劑盒 ，英文名： MMP-9 ELISA Kit

Human apoptosis signal regulating kinase I (ASK-1) ELISA Kit 人凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶I(ASK-1)試劑盒

MonkeyIerferonγ,IFN-γELISAKit 猴γ干擾素(IFN-γ)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforbFGF-6(Humanbasicfibroblastgrowthfactor6)ELISAKit人堿性成纖維細(xì)胞生長因子6

細(xì)菌乳酸脫氫酶(LDH)總活性酶動(dòng)力比色法定量試劑盒20次

RabbitIerleukin3,IL-3ELISAKit兔子白介素3(IL-3)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠β甘露糖苷酶(β Manase)ELISA 試劑盒

Human vitamin C (VC) ELISA Kit 人C(VC)試劑盒

Humancalmodulin,CAMELISAKit 人鈣調(diào)素(CAM)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanchemerin試劑盒人chemerin試劑盒規(guī)格：96T/48T

轉(zhuǎn)基因玉米NK603品系試劑盒20次

Humanserineprotease，PRSSELISAKit人絲蛋白酶(PRSS)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人組酸豐富糖蛋白(HRG)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human HRG (Histidine Rich Glycoprotein) ELISA Kit

人乙酰肝素蛋白多糖(HSPG)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human HSPG (Heparan Sulfate Proteoglycan) ELISA Kit

人膜聯(lián)蛋白A5(ANXA5)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human ANXA5 (Annexin A5) ELISA Kit

人HA絲酸肽酶1(HA1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human HA1 (HA Serine Peptidase 1) ELISA Kit

FAM160A1蛋白抗體

核受體相互作用蛋白2抗體

ANGPTL4重組小鼠 ANGPTL4 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

基質(zhì)金屬蛋白酶26(MMP26)重組蛋白 Recombinant Matrix Metalloproteinase 26 (MMP26)

SIGLEC6重組人 SIGLEC6 / CD327 蛋白  Protein

ACVR2A Protein Human 重組人 ACVR2 / ACTRII / ACVR2A 蛋白 (His 標(biāo)簽)

IL12B Protein Marmoset 重組絨猴 IL12B / IL-12B 蛋白

OP9 細(xì)胞專用培養(yǎng)基ACTH (Adrenorticotrophin hormons 0.2mgACTH (Adrenorticotrophin hormons)(7-23) 促腎上腺皮質(zhì)激素(7-23)(抗原)

IL21 Protein Human 重組人 Interleukin-21 / IL-21 蛋白

CXCL2重組小鼠 CXCL2 / GRO2 / MIP-2 蛋白 (His & SUMO 標(biāo)簽) Protein

EDA2R Protein Rat 重組大鼠 XEDAR / EDA2R 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

ADAMTSL1重組人 ADAMTSL1 / PUNCTIN 蛋白 Protein