鹿特定基因序列(Deer)核酸檢測(cè)試劑盒方法使用及效果：
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大小）或直徑約為0.5-0.7 cm（或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保溫10-15 分鐘，加入0.1 mL 溶液B，混勻，直接取上清液（相當(dāng)于PCR 體積的1/10）作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。

樣本采集、存放及運(yùn)輸：
1、樣本采集：各類(lèi)型樣本按照常規(guī)方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h，-70℃以下可長(zhǎng)期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（zui多凍融3次）；
3、運(yùn)輸：采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
?
自備物品：
15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標(biāo)儀：用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件：
14℃或－20℃
準(zhǔn)備物品
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)                                   1份

3-氯-4-吡分子式：138.55分子量： C6H3ClN2英文名稱：3- chloro -4- cyanopyridineCAS號(hào)：68325-15-5

它勃寧英文名稱：It 40CAS號(hào)：4429-63-4分子式：336.43分子量：C21H24N2O2

(R,R)-(+)-2,2'-異亞丙雙(4-叔丁-2-惡唑啉)分子式：294.44分子量： C17H30N2O2英文名稱：(R, R) - (+) -2,2'- isopropylidenebis (4- tert butyl -2- oxazolinyl)CAS號(hào)：131833-97-1

6,7-二甲氧豆素英文名稱：6,7- two aCAS號(hào)：120-08-1分子式：206.1947分子量：C11H10O4

2-溴-3-硝吡分子式：202.99分子量： C5H3BrN2O2英文名稱：2- -3- nitro pyridineCAS號(hào)：19755-53-4

3--4-甲氧三氟甲分子式：191.15分子量： C8H8F3NO英文名稱：3- amino -4- three fCAS號(hào)：349-65-5

2-(甲氨)三氟甲分子式：175.15分子量： C8H8F3N英文名稱：2- (methyl ammonia) three fCAS號(hào)：14925-10-1

6-甲氧-2-乙酰萘分子式：200.23分子量： C13H12O2英文名稱：6- a -2- acetyl naphthaleneCAS號(hào)：3900-45-6

細(xì)胞染色劑黃綠素-AM英文名稱：Cell stain calcein -AMCAS號(hào)：148504-34-1分子式：994.857分子量： C46H46N2O23

氯木蘭花堿英文名稱：Chlorinated MagnoliaCAS號(hào)：分子式：377.86186分子量：C20H24ClNO4

天青A英文名稱：Azure ACAS號(hào)：37247-10-2分子式：625.68分子量： C16H18N3S · C15H1<

鹿特定基因序列(Deer)核酸檢測(cè)試劑盒方法CCL17/ABCD2  胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子抗體 0.1ml

Adenylate kinase 2/AK2  腺苷酸激酶1抗體 0.2ml

FMDV Polyprotein (VP1 protein)  口蹄疫病毒A型抗體(N端) 0.2ml

MTNR1A/MTR-1A/MEL-1A-R  褪黑素受體1A/松果體素受體1A抗體 0.1ml

IL-2  白介素2抗體 0.2ml

LIMS1  整合素和生長(zhǎng)因子樣蛋白1抗體 0.1ml

TXNRD1  硫氧環(huán)蛋白還原酶1抗體 0.2ml

HURP/DAP5  肝癌上調(diào)蛋白抗體 0.2ml

FAIM3  FAS凋亡抑制分子3抗體 0.2ml

phospho-ATXN1(Ser775)  磷酸化失調(diào)癥蛋白1抗體 0.1ml

NANOGP8  干細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子NANOGP8抗體 0.2ml

C19orf46  19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框46抗體 0.2ml

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。