?無(wú)菌操作?：細(xì)胞培養(yǎng)需在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行，使用前需對(duì)超凈工作臺(tái)進(jìn)行紫外線照射滅菌，定期清潔培養(yǎng)箱。實(shí)驗(yàn)人員需更換工作服、鞋套，戴口罩、手套。

?器材滅菌?：玻璃器皿、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購(gòu)買(mǎi)已滅菌產(chǎn)品。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液、血清、緩沖液等試劑應(yīng)無(wú)菌、無(wú)污染，使用前需進(jìn)行無(wú)菌檢測(cè)。不同細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)液成分要求有差異，應(yīng)按細(xì)胞類(lèi)型選擇合適培養(yǎng)液。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃，偏差應(yīng)控制在±0.5℃。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性，定期檢查氣體濃度與流量，細(xì)胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)、生長(zhǎng)狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化。

?定期檢測(cè)?：定期對(duì)細(xì)胞進(jìn)行支原體、細(xì)菌、真菌等污染檢測(cè)。

HUH-1 細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基

產(chǎn)品介紹

HUH-1細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試，本產(chǎn)品可保持HUH-1細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含HUH-1細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無(wú)需添加任何成分，可直接用于HUH-1 細(xì)胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

DMEM 基礎(chǔ)培養(yǎng)基                                          445 mL

特級(jí)胎牛血清                                              50 mL

運(yùn)輸和保存

運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；?

注意僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來(lái)水沖洗即可。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃；

2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱；

3) 戴上護(hù)目鏡，厚毛線手套后，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動(dòng)凍存管以提高復(fù)溫速率；

4) 將融化了的凍存管中的細(xì)胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中，混勻后，1000rpm 離心 5min；

5) 準(zhǔn)備一個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶，寫(xiě)上細(xì)胞名稱(chēng)、日期，再加入 4ml 培養(yǎng)基；

6) 離心完成后棄去上清，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后，轉(zhuǎn)入 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)中，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。

傳代 （細(xì)胞傳代建議一傳二）

1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時(shí)，可進(jìn)行傳代。

2) 在生物安全柜內(nèi)，打開(kāi)培養(yǎng)瓶瓶口，收集瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基；

3) 向培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入 3ml 無(wú)菌的 1×PBS 后，水平放置培養(yǎng)瓶，使PBS 能夠浸潤(rùn)到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積，吸棄 PBS；

4) 向瓶?jī)?nèi)加入消化液 1ml，浸潤(rùn)底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起，若全部消化下來(lái)則直接向培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中，將懸液吸入 15ml 離心管；

① 準(zhǔn)備一個(gè)無(wú)菌的 15ml 離心管，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基；

② 將消化下來(lái)的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右，輕拍培養(yǎng)瓶，95%左右細(xì)胞脫。

6) 1000rpm 離心 5min；

7) 準(zhǔn)備兩個(gè)新的 T-25 培養(yǎng)瓶，各加入 4ml培養(yǎng)基。

8) 離心完成后，棄上清，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞，將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶，每個(gè)培養(yǎng)瓶各 1ml；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶，震蕩混勻后，將培養(yǎng)瓶置于 37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。 

凍存 （細(xì)胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后，棄上清，用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過(guò)夜降溫；

9）第二天，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存。

豚鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human cytotoxic T lymphocyte associated aigen 4 (CTLA-4/CD152) ELISA kit E 人細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4(CTLA-4/CD152)試劑盒E

Humanai-cardiolipinaibodyIgA,ACA-IgAELISAKit 人抗心0脂抗體IgA(ACA-IgA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumancaneousTcell-atactingchemokine,CTACK試劑盒人皮膚T細(xì)胞虜獲趨化因子(CTACK/CCL27)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織EPHB4激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

HumanProgesterone，PROGELISAKit人孕激素/孕同(PROG)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA 試劑盒

Human urokinase type plasminogen activator (uPA/PLAU) ELISA Kit 人型纖溶酶原激活物(uPA/PLAU)試劑盒

HumanNuclearmaixprotein22,NMP-22ELISAKit 人核基質(zhì)蛋白22(NMP-22)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

guineapigmaixmetalloproteinase9,MMP-9試劑盒豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母細(xì)胞漿可溶性總蛋白制備試劑盒20次

MouseBrainderivedneuroophicfacor,BDNFELISAKit小鼠腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人重肽鐵蛋白(FTH)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒   Human FTH (Ferritin, Heavy Polypeptide) ELISA Kit

人Pirin蛋白(PIR)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒   Human PIR (Pirin) ELISA Kit

人多藥耐藥相關(guān)蛋白1(MRP1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒   Human MRP1 (Multidrug Resistance Associated Protein 1) ELISA Kit

人突觸足蛋白(SYNPO)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒   Human SYNPO (Synaptopodin) ELISA Kit

轉(zhuǎn)錄因子KLF9抗體

玻璃粘連蛋白抗體

BMP2重組斑馬魚(yú) BMP-2 / BMP2A 蛋白 Protein

TRAF2/TNF-R2 (TNF receptor-associated factor 2 0.5mlTRAF2/TNF-R2 (TNF receptor-associated factor 2) 壞死因子受體相關(guān)因子2抗原

ACVRL1重組人 ALK-1 / ACVRL1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

ACTR3 Protein Human 重組人 ACTR3 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

TFPI Protein ???

HUH-1 細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基GABA/KLH γ1氨基偶聯(lián)血藍(lán)蛋白 1mgGABA/KLH γ1氨基偶聯(lián)血藍(lán)蛋白

IL36G Protein Human 重組人 IL36G / IL1F9 蛋白 (aa 18-169)

IL1RN重組大鼠 IL-1RA / IL1RN 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

KIT Protein Mouse 重組小鼠 c-kit / CD117 蛋白

CD22重組人 Siglec-2 / CD22 蛋白 Protein