細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺(tái)，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動(dòng)使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

人原代黑色素細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測(cè)試，本產(chǎn)品可保持人原代黑色素細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含人原代黑色素細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于人原代黑色素細(xì)胞的培養(yǎng)。

注意事項(xiàng)：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

公司正在出售的產(chǎn)品：

H1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin 0.5mgH1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin) 流感病毒A抗原

C7 Protein Human 重組人 C7 / Complement component 7 蛋白

CXCL16重組大鼠 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

TNFRSF13C Protein Mouse 重組小鼠 BAFFR / TNFRSF13C / CD268 蛋白

PDE9A重組人 PDE9A 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

大鼠含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪酸激酶2(Tie-2)試劑盒 ，英文名： Tie-2 ELISA Kit

Rabbit glycated hemoglobin A1c (GHbA1c) ELISA Kit 兔糖化血紅蛋白A1c(GHbA1c)試劑盒

腸道病毒EV71核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMouseangiotensionII,ANG-IIELISAKit小鼠血管緊張素Ⅱ

體液肌酸激酶同工酶肌肉型(CK-MM)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量試劑盒20次

ELISAKitPROG犬孕激素/孕同

組織因子抑制物 (TFPI)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

轉(zhuǎn)移生長因子 - a (TGF -a )   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

轉(zhuǎn)移生長因子 -β1(TGF- b 1)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

轉(zhuǎn)移生長因子 -β2(TGF- b 2)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

組裝/原裝

Rat low density lipoprotein immune complexes (LDL-IC) ELISA Kit 大鼠低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)試劑盒

Humaeceptorforadvancedglycationendproducts,RAGE/AGERELISAKit 人晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(RAGE/AGER)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitfor16-AlphaOHE-1(Mouse16-AlphaHydroxyesogen1)ELISAKitHpt/HP小鼠16α羥基雌同1

飲料鎂離子濃度化學(xué)比色法定量試劑盒20次

MouseLeptin,LEPELISAKit小鼠瘦素(LEP)試劑盒

PE-Cy7標(biāo)記人CD38單克隆抗體

小鼠抗人CD20單克隆抗體

人原代黑色素細(xì)胞專用培養(yǎng)基CXCL16重組大鼠 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

H1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin 0.5mgH1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin) 流感病毒A抗原

PDE9A重組人 PDE9A 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

C7 Protein Human 重組人 C7 / Complement component 7 蛋白

TNFRSF13C Protein Mouse 重組小鼠 BAFFR / TNFRSF13C / CD268 蛋白

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動(dòng)使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長到80%~90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動(dòng)使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時(shí)后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。