細胞實驗步驟：

一、細胞復蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風30min；

2.預熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞，將細胞懸液轉移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻，并做好標記；

13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態(tài)；

14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

大鼠腦微血管內(nèi)皮細胞永生化 細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持大鼠腦微血管內(nèi)皮細胞永生化 細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含 大鼠腦微血管內(nèi)皮細胞永生化 細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于 大鼠腦微血管內(nèi)皮細胞永生化 細胞的培養(yǎng)。

內(nèi)皮細胞培養(yǎng)體系          500 ml

產(chǎn)品主要成分

內(nèi)皮細胞基礎培養(yǎng)基                                          465 ml

運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；?

注意事項：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細胞培養(yǎng)步驟：

?細胞復蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細胞傳代?：

當細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當細胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補加新鮮培養(yǎng)基。

做好標記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉移到冷凍保存管中，標記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human growth associated protein 43 (GAP-43) ELISA Kit 人生長相關蛋白43(GAP-43)試劑盒

Humaninsulinaoaibodies,IAAELISAKit 人胰島素自身抗體(IAA)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanai-rubellavirusIgMaibody,ai-RVIgM試劑盒人抗風疹病毒IgM抗體(ai-RVIgM)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物細胞周期G1早期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒10次

HumauberculosisaibodyIgG，TB-AbIgGELISAKit人結核菌桿抗體IgG(TB-AbIgG)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠雄激素受體(AR)試劑盒 ，英文名： AR ELISA Kit

Mouse heat shock protein 20 (Hsp-20) ELISA Kit 小鼠熱休克蛋白20(Hsp-20)試劑盒

MouseTissuefactor,IFELISAKit 小鼠組織因子(TF)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanai-typhusaibodyELISAKit人抗斑疹傷寒抗體

細胞ERK2激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitMCP-1/CCL2/MCAF大鼠單核細胞趨化蛋白1

小鼠GATA結合蛋白4(GATA4)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠干擾素誘導蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠上皮中性粒細胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠抗Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

生長停滯特異性蛋白8抗體

AF750標記的ADCK1蛋白抗體

ACE2重組小鼠 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 Protein

AHA3 peptide 植物蛋白AHA3抗原(擬南芥 0.5mgAHA3 peptide 植物蛋白AHA3抗原(擬南芥)

MAX重組人 MAX / MYC associated factor X 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

CD59 Protein Human 重組人 CD59 蛋白

CD34 Protein Rat 重組大鼠 CD34 蛋白 (Fc 標簽)

大鼠腦微血管內(nèi)皮細胞永生化細胞專用培養(yǎng)基HDAC1/HD1(histone deacetylase 1 0.5mgHDAC1/HD1(histone deacetylase 1) 組織蛋白去乙酰化酶1抗原

EPHA2 Protein Human 重組人 EphA2 蛋白 (aa 585-976, His & GST 標簽)

LCN2重組大鼠 LCN2 / NGAL 蛋白 Protein

CD79B Protein Mouse 重組小鼠 CD79B / B29 蛋白

DSC2重組人 DSC2 / Desmocollin-2 蛋白 Protein